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诱发实验动物肝癌的几种方法
点击次数:395 发布时间:2018-01-12

造模原理:利用外源性化学致癌因素引起细胞遗传特性异常,呈现出异常生长和高增值活性,形成癌症。常用的致癌物质有:DEN(乙亚硝基胺)、DBA(4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF(2-乙酰氨基酸)、OAAT(亚胺基偶氮甲苯)和黄曲霉素等。

1、DEN诱导:取体重250g左右的封闭群大鼠,雌雄不限,喂养普通饲料,随意饮水,给与0.25%的DEN水溶液0.25~1mL灌胃或稀释10倍放在饮水瓶中自由饮水,剂量为每天2~10ml/kg喂养半年以上。

2、OAAT诱发小鼠肝癌:用1% OAAT溶液涂在小鼠的两肩胛间皮肤上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次,连续7~8周即可。

3、DBA诱发大鼠肝癌:用含0.06% DBA的饲料喂养大鼠,饲料中DBA不应超过1.5~2mg/kg,连续喂养4~6个月。

4、黄曲霉素诱发大鼠肝癌:用0.001~0.015 ppm黄曲霉素的饲料喂6个月。

总结: DEN诱发大鼠致癌率为70%,DBA为60%,OAAT涂抹法7~8周即可出现*个肿瘤。黄曲霉素诱发大鼠肝癌发生率为80%。上述方法从病因学角度分析,与人体肿瘤较为近似,可用于肿瘤特点的深入研究。

整体课题外包和整体实验服务

1、动物模型:糖尿病模型、帕金森动物模型、脑中风动物模型、脊髓损伤动物模型、肝损伤动物模型、裸鼠成瘤模型、腹腔注射、灌胃、尾静脉注射等。

2、细胞功能检测:慢病毒、腺病毒、合成试剂或RNAi类产生的基因过表达或基因沉默、细胞迁移和侵袭检测、细胞凋亡检测(tunel和流式检测)、细胞周期检测(流式方法、Brdu)、细胞克隆形成、淋巴细胞分离、原代细胞分离培养、耐药细胞株建立、稳转株的构建等。

3、分子生物学实验:RT-PCR、QPCR、载体构建、基因芯片等

4、蛋白检测:免疫组化、westerblot、ELISA、蛋白芯片等。

5、病理检测:HE染色、病理分析等。

 

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