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STC-1细胞可能存在的问题及解决方案
点击次数:95 发布时间:2019-07-25
   STC-1细胞可能存在的问题及解决方案
  STC-1细胞培养的工作原则:
  1.采用标准化的工作方法。
  2.培养用的液体极多,应由专人负责,并保证做到按规程行事,配制浓度准确,灭菌可靠,所有配好的溶液瓶上都要标明名称、浓度、消毒与否和制备日期等。
  3.一切培养用品都要有固定的存放点,培养用品与非培养用品应严格分开。
  STC-1细胞可能存在的问题及解决方案
  问题1:培养液pH值变化太快
  可能原因
  (1)CO2张力不对
  (2)培养瓶盖拧得太紧
  (3)NaHCO3缓冲系统缓冲力不足
  (4)培养液中盐浓度不正确
  (5)细菌、酵母或真菌污染
  建议解决方法
  (1)按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。
  (2)松开瓶盖1/4圈。
  (3)改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。
  (4)在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。
  (5)丢弃培养物,或用抗生素除菌。
  问题2:培养液出现沉淀,但pH值不变
  可能原因
  (1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来
  (2)冰冻保存培养液
  建议解决方法
  (1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。
  (2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。
  问题3:培养液出现沉淀,同时pH发生变化
  可能原因
  细菌或真菌污染
  建议解决方法
  丢弃培养物,或用抗生素除菌。
  问题4:培养细胞不贴壁
  可能原因
  (1)胰蛋白酶消化过度
  (2)支原体污染
  (3)培养瓶瓶底不干净
  (4)培养液pH值过碱(NaHCO3分解)
  (5)消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当
  (6)STC-1细胞老化(如传代前细胞已汇合导致失去贴附性)
  (7)接种细胞起始浓度太低或太高
  以上便是今天关于STC-1细胞可能存在的问题及解决方案的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
 
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